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液相色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長(cháng)柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時(shí)間后就會(huì )出現柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時(shí)間改變等變化,如不采取措施,將會(huì )縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟損失。
液相色譜柱使用一段時(shí)間后,常遇到柱子被污染,柱效會(huì )有一定程度的下降,采用適當的方法對色譜柱進(jìn)行保護,可以延長(cháng)色譜柱的使用壽命。樣品和流動(dòng)相的處理:溶解的樣品進(jìn)樣前用濾膜過(guò)濾,以除去不溶物。如果必要,需進(jìn)行樣品的預處理。流動(dòng)相中如有不純物質(zhì)將影響柱效,所以溶劑盡量使用色譜級別的,至少是分析純級別,流動(dòng)相使用前用微孔薄膜過(guò)濾。在流動(dòng)相的輸液管前安裝過(guò)濾器。過(guò)濾器定期用甲醇超聲清洗,如果效果不好,可用10%的稀硝酸浸泡清洗。對于堵塞嚴重的過(guò)濾器,可在火焰上灼燒后再清洗。保護柱(預柱)的使用:對于較昂貴的色譜柱,可以在柱前加一保護柱,防止樣品中雜質(zhì)污染分析柱,對于制備柱,因其進(jìn)樣量大,使用保護柱尤為重要。
液相色譜柱的使用注意事項:
色譜柱的柱效和保護柱
拿到一根新柱時(shí),一定要先看其使說(shuō)明,然后測柱效,定期檢測柱效, 保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件, 定期檢測儀器的譜帶展寬。 若應用于在線(xiàn)監測, 應對色譜柱提供在線(xiàn)的物理保護和化學(xué)保護, 例如采取安裝在線(xiàn)過(guò)濾器, 自裝填料保護柱和預裝保護柱等。在線(xiàn)過(guò)濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計,優(yōu)點(diǎn)是基本不影響柱效, 在需要高柱效的時(shí)候常用, 常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染。 缺點(diǎn)是多數保護柱影響色譜柱的柱效, 特別是在用微柱時(shí),常用的是普通 自裝填料的保護柱。
色譜柱的清洗
對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力zui強的流動(dòng)相清洗,對于硅膠柱,先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷 1 0 0 - 2 0 O r aL依次活化,對于鍵和相柱,一般用甲醇一lvfang一甲醇一水依次沖洗,每種色譜柱有特定的清洗方法,一定要看其使用說(shuō)明
色譜柱的存放
存放前除去雜質(zhì)和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機械振動(dòng),防止細菌生長(cháng),注意存放的溫度。
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